人低氧誘導(dǎo)因子1α (HIF-1α) ELISA 試劑盒

試劑盒性能

1. 檢測范圍：1.95 nmol/L –100 nmol/L。

2. 靈敏度：低檢測濃度小于0.78 nmol/L。

3. 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4. 重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ，板間變異系數(shù)小于15% 。

試劑盒組成

操作步驟

1.從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回 4℃。

2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔，空白孔什么都不加；標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 50μL；

3. 待測樣本孔先加待測樣本 10μL，再加樣本xishi液 40μL；

4. 隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中（空白孔不加）加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體 50μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。

5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置 1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗 板 5 次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6. 所有孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。

7. 所有孔加入終止液 50μL，15min 內(nèi)，在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。

結(jié)果判斷

 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：在Excel工作表中，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。

人低氧誘導(dǎo)因子1α (HIF-1α) ELISA 試劑盒

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

1. 保證試劑盒的質(zhì)量：選擇正規(guī)廠家生產(chǎn)的試劑盒，確保試劑盒的質(zhì)量和穩(wěn)定性。

2. 嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件：實(shí)驗(yàn)過程中要嚴(yán)格控制溫度、pH值、離子強(qiáng)度等條件，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

3. 避免交叉污染：實(shí)驗(yàn)過程中要避免交叉污染，確保每個(gè)步驟使用的試劑和材料都是清潔無污染的。

4. 標(biāo)準(zhǔn)化操作：實(shí)驗(yàn)操作要標(biāo)準(zhǔn)化，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作，避免人為誤差對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。

5. 定期校準(zhǔn)：定期對(duì)實(shí)驗(yàn)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，確保儀器的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。

6. 保存好實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：實(shí)驗(yàn)過程中要保存好實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，以便后續(xù)分析和處理。

 洗板方法

1.手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置 1min 后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板 5次。

2.自動(dòng)洗板機(jī)：每孔注入洗液 350μL，浸泡 1min，洗板 5 次。


 

洗板方法

1.手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置 1min 后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板 5次。

2.自動(dòng)洗板機(jī)：每孔注入洗液 350μL，浸泡 1min，洗板 5 次。