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人膠質(zhì)細(xì)胞源性連接蛋白(GDN) ELISA 試劑盒
產(chǎn)品簡介
ELISA試劑盒是一種用于定量檢測(cè)人血清、血漿、細(xì)胞上清液等樣本中蛋白濃度的試劑盒。該試劑盒采用間接酶聯(lián)免疫吸附法(Indirect ELISA),通過特異性抗體捕獲目標(biāo)蛋白,再通過酶標(biāo)記二抗進(jìn)行信號(hào)放大和檢測(cè),具有高靈敏度、高特異性和高重現(xiàn)性的優(yōu)點(diǎn)。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒基于間接酶聯(lián)免疫吸附法(Indirect ELISA)原理,包被有特異性抗抗體的包被板作為捕獲劑,將待測(cè)樣本加入已包被抗體的包被板中,樣本蛋白與特異性抗體結(jié)合,形成免疫復(fù)合物。通過洗滌去除未結(jié)合的蛋白質(zhì),然后加入酶標(biāo)記的二抗,與免疫復(fù)合物中的樣本結(jié)合。再通過洗滌去除未結(jié)合的酶標(biāo)記二抗,加入底物溶液,在酶的作用下生成有色產(chǎn)物。最后通過測(cè)量光密度值,計(jì)算出待測(cè)樣本中的濃度。
實(shí)驗(yàn)材料和試劑
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 移液器及吸頭
3. 包被板
4. 洗滌液
5. 底物溶液
6. 終止液
7. 標(biāo)準(zhǔn)品:不同濃度的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品
8. 待測(cè)樣本:人血清、血漿、細(xì)胞上清液等
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本,將標(biāo)準(zhǔn)品按照說明書要求稀釋至適當(dāng)濃度。
2. 將稀釋好的標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本加入已包被抗體的包被板中,充分混勻,37℃孵育一定時(shí)間。
3. 洗滌包被板,去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)。
4. 加入酶標(biāo)記的二抗,與免疫復(fù)合物中的樣本結(jié)合,37℃孵育一定時(shí)間。
5. 再次洗滌包被板,去除未結(jié)合的酶標(biāo)記二抗。
6. 加入底物溶液,37℃孵育一定時(shí)間后,加入終止液。
7. 在酶標(biāo)儀上測(cè)量光密度值(450nm)。
8. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算待測(cè)樣本中蛋白的濃度。
注意事項(xiàng)
1. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,請(qǐng)務(wù)必按照實(shí)驗(yàn)步驟操作,并注意控制孵育時(shí)間和溫度。
2. 在使用試劑盒之前,請(qǐng)仔細(xì)閱讀產(chǎn)品說明書,確保正確理解和掌握實(shí)驗(yàn)操作步驟。
3. 請(qǐng)勿將試劑盒保存在過高或過低的溫度環(huán)境中,以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4. 試劑盒中的抗體和酶標(biāo)記二抗是關(guān)鍵成分,長時(shí)間保存可能會(huì)影響其活性,因此建議在規(guī)定時(shí)間內(nèi)使用。
人膠質(zhì)細(xì)胞源性連接蛋白(GDN) ELISA 試劑盒
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