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選擇一款合適的酶標(biāo)板,是ELISA實驗成功的步,然而很多人卻忽略了這一點。大家在做實驗時往往只考慮實驗本身,卻
不知道產(chǎn)品往往對實驗也有很大影響。合適的選擇產(chǎn)品,將有助于實驗的成功進(jìn)行。我們在進(jìn)行ELISA實驗的時候通???/span>
慮以下這些因素:
現(xiàn)在的廠家均將酶標(biāo)孔設(shè)計成立的柱狀,適當(dāng)?shù)卦龃罂着c孔之間的距離,使之能立分開,從而程度地減少交叉污染。不同
種類的酶標(biāo)板其孔底的形狀是不同的。以下是一些常見孔底形狀:
平底:底部水平,也叫F底。光透過底部不會發(fā)生偏折,可以程度的透光。應(yīng)用于因可視性或其他原理需要用到圓底的實
驗。
圓底:也叫U底,提供的清洗效果以及混合型能,適合需要測試沉淀物的應(yīng)用。
C型底:介于平底和圓底之間能夠提供好的清洗效果,同時結(jié)合了平底的優(yōu)點。
錐型底:又稱V底,適用于取樣以及儲存微量樣本,以獲得小容量的回收。
酶標(biāo)板的顏色有三種:透明、黑色、白色。
絕大多數(shù)ELISA都選擇透明板作為實驗材料。白色和黑色的酶標(biāo)板一般用于發(fā)光檢測。黑色的酶標(biāo)板自身會有光吸收,所
以其信號要弱于白色的酶標(biāo)板。黑色的酶標(biāo)板一般用于檢測較強的光,如熒光檢測;相反,白色的酶標(biāo)板可用于較弱的光
檢測,常用于一般的化學(xué)發(fā)光和底物顯色(如雙熒光素酶報告基因分析)。
常見的材質(zhì)有聚乙烯(polyethylene,PE),聚丙烯(polypropylene,PP),聚苯乙烯(Polystyrene,PS),聚氯乙烯
(Polyvinylchloride,PVC)以及聚碳酸酯(Polycarbonate,PC)。ELSIA中應(yīng)用廣的材料是聚苯乙烯和聚氯乙烯。聚氯乙烯質(zhì)軟
板薄,可剪割,價格低廉。缺點是光潔度不如聚苯乙烯板,孔底也不如聚苯乙烯平整。但相應(yīng)的背景值也會有所增加。通
常要在酶標(biāo)板表面進(jìn)行離子接枝處理,在聚合物表面引入醛基、氨基、環(huán)氧基等活性官能團(tuán),提高基體表面的性能。
包被物質(zhì)與板底表面的有效結(jié)合是ELISA中至關(guān)重要的一步。因此,在實驗開始前應(yīng)仔細(xì)分析待包被物質(zhì)的結(jié)構(gòu)特點與化
學(xué)特性,以選擇適當(dāng)?shù)拿笜?biāo)板。一般來說,包被物質(zhì)與板底有以下幾種結(jié)合方式:被動吸附、共價結(jié)合和親和捕獲。
被動吸附(Passive Adsorption):被動吸附的機理比較復(fù)雜,包被物質(zhì)與板底之間的結(jié)合主要依靠分子間作用力(范德華
力)和氫鍵。在絕大多數(shù)ELISA中,包被物質(zhì)與板底的結(jié)合都是依靠被動吸附來完成的。一般來說,中等分子量及大分子
量的抗原(或抗體)與板底之間的結(jié)合是依靠被動吸附來完成的。在挑選酶標(biāo)板時通常要考慮板底表面的疏水性/親水性
特征。下表中列出了不同親水性的板底表面的適用范圍及用途:
試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或生物體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔(dān), 本公司概不負(fù)責(zé)。
嚴(yán)格按照說明書操作,不同批號不可交換使用,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔(dān)。
人同源框蛋白Hox-B4(HOXB4) ELISA 試劑盒
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