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人泛素結(jié)合酶E2A(UBE2A) ELISA 試劑盒
準(zhǔn)備工作
1.孔板室溫平衡1小時(shí)
2.做好布板圖譜
3.樣本解凍
4.準(zhǔn)備各型號(hào)的移液槍、槍頭、量筒
5.準(zhǔn)備雙蒸水
6.根據(jù)樣本量配好樣本xi稀釋液
7.根據(jù)樣本量及洗板次數(shù)配好洗液
8.若需要提前設(shè)置好振板器、洗板器
9.準(zhǔn)備足夠量的擦手紙
10.根據(jù)說(shuō)明書(shū)提示,溶解標(biāo)準(zhǔn)品
11.配制不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品
12.配制質(zhì)控品
13.根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果稀釋樣本
14.準(zhǔn)備好封板膜
注意事項(xiàng)
1. 試劑盒保存于2-8℃,切勿反復(fù)凍融或長(zhǎng)時(shí)間保存于室溫。
2. 實(shí)驗(yàn)前確保所有試劑均已恢復(fù)至室溫。
3. 加樣時(shí)注意避免產(chǎn)生氣泡。
4. 洗滌時(shí)要保證充分洗滌,避免殘留物影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
5. 底物溶液應(yīng)避光保存,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中。
6. 酶標(biāo)儀應(yīng)使用450nm波長(zhǎng)進(jìn)行讀數(shù),其他波長(zhǎng)可能導(dǎo)致誤差。
7. 本試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn)和診斷參考,不適用于臨床診斷和治療。
操作步驟
1. 包被:將抗原溶液加入聚苯乙烯酶標(biāo)板孔中,包被抗原,37℃孵育1小時(shí)。
2. 清洗:清洗酶標(biāo)板,去除未結(jié)合的抗原和其他雜質(zhì)。
3. 阻斷:加入阻斷液,37℃孵育30分鐘,以封閉酶標(biāo)板上的非特異性結(jié)合位點(diǎn)。
4. 清洗:清洗酶標(biāo)板,去除未結(jié)合的阻斷液和其他雜質(zhì)。
5. 加樣:加入標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本,37℃孵育1小時(shí)。
6. 清洗:清洗酶標(biāo)板,去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)。
7. 加酶標(biāo)抗體:加入酶標(biāo)記的抗體,37℃孵育1小時(shí)。
8. 清洗:清洗酶標(biāo)板,去除未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。
9. 顯色:加入TMB底物溶液,37℃孵育15-30分鐘。
10. 終止反應(yīng):加入終止液,停止顯色反應(yīng)。
11. 檢測(cè):在450nm波長(zhǎng)下讀取吸光度值(OD值)。
人泛素結(jié)合酶E2A(UBE2A) ELISA 試劑盒
試劑盒組成
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說(shuō)明書(shū) | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) | |
酶標(biāo)包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品:36U/L | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標(biāo)試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說(shuō)明書(shū) | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) |
結(jié)果分析
根據(jù)試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品濃度及對(duì)應(yīng)的OD值,利用標(biāo)準(zhǔn)品繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算待測(cè)樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,通過(guò)計(jì)算得到待測(cè)樣品的濃度。
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