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人樁蛋白(Pax) ELISA 試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:
  • 更新時間:2024-09-08

簡要描述:我司提供免費代測,委托單位的試驗材料和試劑等均須采用特快專遞形式郵寄,有低溫要求的、固定要求的,按低溫保存、固定防碎方法運輸,以確保實驗樣本的安全。如數(shù)量巨大,我司可以讓專業(yè)人員前往提取。詳情請與我司銷售人員聯(lián)系。

人樁蛋白(Pax) ELISA 試劑盒

產(chǎn)品詳情

人樁蛋白(Pax) ELISA 試劑盒 


本試劑盒基于酶聯(lián)免疫吸附試驗原理,通過間接法檢測樣本中的白蛋白。將抗原包被在固相載體上,然后加入樣本和特異性抗體,抗原抗體結(jié)合形成免疫復(fù)合物。洗滌去除未結(jié)合的成分后,加入酶標(biāo)記的二抗,與免疫復(fù)合物中的抗體結(jié)合,形成酶標(biāo)記的免疫復(fù)合物。最后加入底物顯色,顏色深淺與樣本中白蛋白的含量呈正相關(guān)。

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實驗步驟

1. 樣品收集與處理

(1)根據(jù)需要收集不同種類的樣品,如血清、血漿、尿液等。

(2)對于血清和血漿樣品,將采集的血液靜置一段時間后,離心分離出血清或血漿。

(3)對于尿液樣品,收集尿液后,可直接進行檢測。

2. 樣品稀釋

根據(jù)試劑盒說明,對需要稀釋的樣品進行適當(dāng)比例的稀釋。

3. 加樣

(1)按照試劑盒說明,分別將標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和待測樣品加入相應(yīng)的孔中。

(2)每孔加入50μL,輕輕震蕩混勻。

4. 封閉

根據(jù)試劑盒說明,加入適量的封閉液,覆蓋板孔,并輕輕震蕩混勻。封閉液一般為含有一定濃度的非特異性結(jié)合配體的溶液,可以降低非特異性結(jié)合的影響。

5. 洗滌

(1)將板孔洗滌液加入到每個孔中,輕輕震蕩,然后倒掉洗滌液。重復(fù)洗滌3次,每次用洗滌液充分洗滌

(2)最后一次洗滌后,用紙巾輕輕吸干板孔表面的水分。

6. 酶標(biāo)二抗加入及孵育

(1)根據(jù)試劑盒說明,將酶標(biāo)二抗加入相應(yīng)的孔中。

(2)孵育一定時間后,將板孔中的溶液倒掉。

7. 洗滌與顯色

(1)重復(fù)步驟5的洗滌過程。

(2)加入顯色劑,孵育一定時間后,將板孔中的溶液倒掉。

8. 終止反應(yīng)與讀數(shù)

(1)加入終止液,終止酶促反應(yīng)。

(2)用酶標(biāo)儀在450nm波長處讀取各孔的光密度值(OD值)。


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試劑盒組成


試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說明書

1份

1份


封板膜

2片(48)

2片(96)


密封袋

1個

1個


酶標(biāo)包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品:36U/L

0.5ml×1瓶

0.5ml×1瓶

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5ml×1瓶

1.5ml×1瓶

2-8℃保存

酶標(biāo)試劑

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

樣品稀釋液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說明書

1份

1份


封板膜

2片(48)

2片(96)




樣本實驗準(zhǔn)備

        在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天就進行檢測的樣本,及時儲存在4℃?zhèn)溆谩τ诟籼煸贆z測的樣本,及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?,有條件的,最好-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。

液體類標(biāo)本:  包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。

1. 血清:

室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:

應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

3. 尿液:

用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

4. 細胞培養(yǎng)上清:

檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。

5. 培養(yǎng)細胞

    檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

6. 組織標(biāo)本

    切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

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人樁蛋白(Pax) ELISA 試劑盒 



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