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人胰脂肪酶(PL) ELISA 試劑盒

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 更新時(shí)間:2024-09-09

簡(jiǎn)要描述:上海篤瑪生物科技有限公司長(zhǎng)期為高校及醫(yī)院等研究機(jī)構(gòu)提供各類(lèi)品質(zhì)過(guò)硬,價(jià)格實(shí)惠,售后完善的生化試劑,公司擁有完善的庫(kù)存及供應(yīng)體系以及高效穩(wěn)定的利純化技術(shù),保證產(chǎn)品均能現(xiàn)貨供應(yīng)和產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性,相關(guān)活動(dòng)信息可聯(lián)系客服。
人胰脂肪酶(PL) ELISA 試劑盒

產(chǎn)品詳情


人胰脂肪酶(PL) ELISA 試劑盒 


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實(shí)驗(yàn)原理

1. 抗原抗體反應(yīng)

ELISA試劑盒中的抗原或抗體被固定在固相載體上,當(dāng)加入待測(cè)樣本時(shí),樣本中的抗原或抗體與固相載體上的抗原或抗體發(fā)生反應(yīng),形成抗原抗體復(fù)合物。

2. 酶標(biāo)記物的結(jié)合

將酶標(biāo)記物與特異性抗體或抗原結(jié)合,形成酶標(biāo)記抗體或抗原。酶標(biāo)記物在反應(yīng)中起到催化作用,加速反應(yīng)進(jìn)程,提高檢測(cè)靈敏度。

3. 酶促反應(yīng)

在酶標(biāo)記物與抗原抗體復(fù)合物結(jié)合后,加入底物溶液,底物在酶的催化下發(fā)生氧化還原反應(yīng),產(chǎn)生顏色變化。顏色深淺與待測(cè)樣本中的抗原或抗體濃度成正比。

4. 吸光度檢測(cè)

將反應(yīng)體系中的吸光度進(jìn)行測(cè)量,通過(guò)比較標(biāo)準(zhǔn)品溶液與待測(cè)樣本溶液的吸光度值,即可計(jì)算出待測(cè)樣本中的抗原或抗體濃度。


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試劑盒組成


名稱(chēng)

96孔配置

48孔配置

備注

微孔酶標(biāo)板

12孔×8條

12孔×4條

無(wú)

標(biāo)準(zhǔn)品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

無(wú)

樣本xi釋液

6mL

3mL

無(wú)

檢測(cè)抗體

10mL

5mL

無(wú)

20×洗滌緩沖液

25mL

15mL

按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋

底物A

6mL

3mL

無(wú)

底物B

6mL

3mL

無(wú)

終止液

6mL

3mL

無(wú)

封板膜

2張

2張

無(wú)

說(shuō)明書(shū)

1份

1份

無(wú)

自封袋

1個(gè)

1個(gè)

無(wú)




準(zhǔn)備工作

1.孔板室溫平衡1小時(shí)

2.做好布板圖譜

3.樣本解凍

4.準(zhǔn)備各型號(hào)的移液槍、槍頭、量筒

5.準(zhǔn)備雙蒸水

6.根據(jù)樣本量配好樣本xi釋液

7.根據(jù)樣本量及洗板次數(shù)配好洗液

8.若需要提前設(shè)置好振板器、洗板器

9.準(zhǔn)備足夠量的擦手紙

10.根據(jù)說(shuō)明書(shū)提示,溶解標(biāo)準(zhǔn)品

11.配制不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品

12.配制質(zhì)控品

13.根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果稀釋樣本

14.準(zhǔn)備好封板膜


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實(shí)驗(yàn)步驟

1. 樣品收集與處理

(1)根據(jù)需要收集不同種類(lèi)的樣品,如血清、血漿、尿液等。

(2)對(duì)于血清和血漿樣品,將采集的血液靜置一段時(shí)間后,離心分離出血清或血漿。

(3)對(duì)于尿液樣品,收集尿液后,可直接進(jìn)行檢測(cè)。

2. 樣品稀釋

根據(jù)試劑盒說(shuō)明,對(duì)需要稀釋的樣品進(jìn)行適當(dāng)比例的稀釋。

3. 加樣

(1)按照試劑盒說(shuō)明,分別將標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和待測(cè)樣品加入相應(yīng)的孔中。

(2)每孔加入50μL,輕輕震蕩混勻。

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4. 封閉

根據(jù)試劑盒說(shuō)明,加入適量的封閉液,覆蓋板孔,并輕輕震蕩混勻。封閉液一般為含有一定濃度的非特異性結(jié)合配體的溶液,可以降低非特異性結(jié)合的影響。

5. 洗滌

(1)將板孔洗滌液加入到每個(gè)孔中,輕輕震蕩,然后倒掉洗滌液。重復(fù)洗滌3次,每次用洗滌液充分洗滌

(2)最后一次洗滌后,用紙巾輕輕吸干板孔表面的水分。

6. 酶標(biāo)二抗加入及孵育

(1)根據(jù)試劑盒說(shuō)明,將酶標(biāo)二抗加入相應(yīng)的孔中。

(2)孵育一定時(shí)間后,將板孔中的溶液倒掉。

7. 洗滌與顯色

(1)重復(fù)步驟5的洗滌過(guò)程。

(2)加入顯色劑,孵育一定時(shí)間后,將板孔中的溶液倒掉。

8. 終止反應(yīng)與讀數(shù)

(1)加入終止液,終止酶促反應(yīng)。

(2)用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處讀取各孔的光密度值(OD值)。

人胰脂肪酶(PL) ELISA 試劑盒 


結(jié)果判斷

1. 每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值減去空白孔的OD值后作圖,如設(shè)置復(fù)孔,則應(yīng)取其平均值計(jì)算。以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。亦可以O(shè)D值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為縱坐標(biāo),繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2. 推薦使用專(zhuān)業(yè)的曲線制作軟件,如curve expert 1.3或1.4,在軟件界面既可根據(jù)樣品OD值,由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,乘以稀釋倍數(shù);亦可將樣品的OD值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

3. 若樣品OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限,應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測(cè),計(jì)算濃度時(shí)應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。 


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試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或生物體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān), 本公司概不負(fù)責(zé)。

嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作,不同批號(hào)不可交換使用,實(shí)驗(yàn)者違反說(shuō)明書(shū)操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。


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