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簡要描述:上海篤瑪生物科技有限公司長期為高校及醫(yī)院等研究機構(gòu)提供各類品質(zhì)過硬,價格實惠,售后完善的生化試劑,公司擁有完善的庫存及供應(yīng)體系以及高效穩(wěn)定的利純化技術(shù),保證產(chǎn)品均能現(xiàn)貨供應(yīng)和產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性,相關(guān)活動信息可聯(lián)系客服。猴嗜鉻蛋白B(CgB)酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒
猴嗜鉻蛋白B(CgB)酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒
本試劑盒基于酶聯(lián)免疫吸附試驗原理,通過間接法檢測樣本中的白蛋白。將抗原包被在固相載體上,然后加入樣本和特異性抗體,抗原抗體結(jié)合形成免疫復(fù)合物。洗滌去除未結(jié)合的成分后,加入酶標(biāo)記的二抗,與免疫復(fù)合物中的抗體結(jié)合,形成酶標(biāo)記的免疫復(fù)合物。最后加入底物顯色,顏色深淺與樣本中白蛋白的含量呈正相關(guān)。
準(zhǔn)備工作
1.孔板室溫平衡1小時
2.做好布板圖譜
3.樣本解凍
4.準(zhǔn)備各型號的移液槍、槍頭、量筒
5.準(zhǔn)備雙蒸水
6.根據(jù)樣本量配好樣本xi釋液
7.根據(jù)樣本量及洗板次數(shù)配好洗液
8.若需要提前設(shè)置好振板器、洗板器
9.準(zhǔn)備足夠量的擦手紙
10.根據(jù)說明書提示,溶解標(biāo)準(zhǔn)品
11.配制不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品
12.配制質(zhì)控品
13.根據(jù)預(yù)實驗結(jié)果稀釋樣本
14.準(zhǔn)備好封板膜
實驗步驟
1. 準(zhǔn)備:準(zhǔn)備好所有試劑、材料和器具。
2. 溫育:將包被有特異性抗體的酶標(biāo)板放入37℃溫箱中溫育30分鐘。
3. 加樣:分別向各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本,輕輕混勻。
4. 溫育:將酶標(biāo)板放入37℃溫箱中繼續(xù)溫育30分鐘。
5. 洗滌:清洗酶標(biāo)板,除去未結(jié)合的抗原抗體。
6. 加酶標(biāo)二抗:向各孔中加入酶標(biāo)二抗,輕輕混勻。
7. 溫育:將酶標(biāo)板放入37℃溫箱中繼續(xù)溫育30分鐘。
8. 洗滌:清洗酶標(biāo)板,除去未結(jié)合的酶標(biāo)二抗。
9. 加底物溶液:向各孔中加入底物溶液,輕輕混勻。
10. 顯色:將酶標(biāo)板放入37℃溫箱中繼續(xù)溫育15分鐘。
11. 終止:向各孔中加入終止液,混勻。
12. 測量:在450nm波長下測量各孔的光密度值(OD值)。
猴嗜鉻蛋白B(CgB)酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒
注意事項
A 仔細閱讀說明書。
B 檢查試劑盒標(biāo)簽上的有效期。如果超過有效期,請勿使用。
C 按說明書確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)。
D 標(biāo)本制備要規(guī)范,每份標(biāo)本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實驗者,注意低溫保存。
E 準(zhǔn)備好所有實驗額外所需物品,(比如移液器,試管,清洗器,酶標(biāo)儀)。
F 按說明書將所用試劑平衡至室溫,根據(jù)檢測標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量。
G 檢查試劑盒內(nèi)每種試劑的貯存條件,保證所有試劑均按照試劑盒內(nèi)說明書推薦的條件存儲。
H 檢查不穩(wěn)定或者變質(zhì)的試劑溶液(比如沉淀或變色)。有些試劑,比如標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液或者檢測稀釋液,可能在設(shè)計時就含有沉淀物。所有試劑在滴入酶標(biāo)板之前,必需充分混勻。而由于沉淀物的特性,在加入酶標(biāo)板之前,必需不停攪拌。
I 保證充分的孵育時間和溫度。
J 切勿使用不同生產(chǎn)批號的試劑取代現(xiàn)有試劑或混合現(xiàn)有試劑。
K 在混合或溶解蛋白溶液時,避免泡沫產(chǎn)生。
L 在實驗開始之前,安排好實驗流程。
M 在實驗開始之前,清潔工作臺。
N 若有問題,應(yīng)與我公司或代理商的技術(shù)支持聯(lián)系
結(jié)果判斷
1. 每個標(biāo)準(zhǔn)品的OD值減去空白孔的OD值后作圖,如設(shè)置復(fù)孔,則應(yīng)取其平均值計算。以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。亦可以O(shè)D值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為縱坐標(biāo),繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2. 推薦使用專業(yè)的曲線制作軟件,如curve expert 1.3或1.4,在軟件界面既可根據(jù)樣品OD值,由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,乘以稀釋倍數(shù);亦可將樣品的OD值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
3. 若樣品OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限,應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測,計算濃度時應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。
試劑盒 必知說明
1)只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,
2)不能混用其他制造商的產(chǎn)品,只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到好的檢測結(jié)果。
3)由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析,本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險。
4)實驗結(jié)果與試劑盒的有效性、實驗者的相關(guān)操作以及當(dāng)時的實驗環(huán)境密切相關(guān)。
5)請務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。
6)不同批次的同一產(chǎn)品可能會有少許差別,
如:檢測限、靈敏度以及顯色時間等,請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進行實驗操作,網(wǎng)站電子版說明書僅作參考。
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