猴Pirin蛋白(PIR)酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒

實(shí)驗原理

1. 抗體或抗原的吸附：將待測抗原或抗體吸附到固相載體上，常用的載體有微孔板、玻璃纖維、聚苯乙烯等。這些載體表面具有特殊的化學(xué)基團(tuán)，能夠與待測抗原或抗體特異性結(jié)合。

2. 酶標(biāo)記的抗體或抗原的結(jié)合：將酶標(biāo)記的抗體或抗原與待測抗原或抗體結(jié)合，形成酶標(biāo)記的抗原-抗體復(fù)合物。酶標(biāo)記的抗體或抗原具有高度的特異性和親和力，能夠與待測抗原或抗體形成穩(wěn)定的復(fù)合物。

3. 底物顯色反應(yīng)：當(dāng)酶標(biāo)記的抗原-抗體復(fù)合物與底物溶液接觸時，酶能夠催化底物分解，產(chǎn)生顏色變化。通過測量顏色的變化程度，可以判斷待測抗原或抗體的濃度。

試劑盒性能

檢測范圍：5 pg/mL – 160 pg/mL。

 靈敏度：檢測濃度小于1.0 pg/mL。

 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

 重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ，板間變異系數(shù)小于15% 。

猴Pirin蛋白(PIR)酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒

試劑盒組成

實(shí)驗步驟

1. 準(zhǔn)備試劑盒：將試劑盒從冰箱中取出，室溫放置30分鐘以上，使試劑盒恢復(fù)至室溫。

2. 加樣：分別向各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本和空白孔，每孔加入50μl。

3. 孵育：用封板膠紙封住反應(yīng)孔，輕輕振蕩混勻，37℃孵育1小時。

4. 洗滌：甩去孔內(nèi)液體，用洗滌液充分洗滌4-5次，每次30秒。

5. 加酶標(biāo)二抗：每孔加入50μl酶標(biāo)二抗溶液，輕輕振蕩混勻，37℃孵育30分鐘。

6. 洗滌：甩去孔內(nèi)液體，用洗滌液充分洗滌4-5次，每次30秒。

7. 加底物：每孔加入50μl底物溶液，輕輕振蕩混勻，37℃孵育15-20分鐘。

8. 終止反應(yīng)：每孔加入50μl終止液，輕輕振蕩混勻。

9. 讀數(shù)：用酶標(biāo)儀在450nm波長處讀取各孔的光密度值。

注意事項

1. 試劑盒保存于2-8℃，切勿反復(fù)凍融或長時間保存于室溫。

2. 實(shí)驗前確保所有試劑均已恢復(fù)至室溫。

3. 加樣時注意避免產(chǎn)生氣泡。

4. 洗滌時要保證充分洗滌，避免殘留物影響實(shí)驗結(jié)果。

5. 底物溶液應(yīng)避光保存，避免長時間暴露于空氣中。

6. 酶標(biāo)儀應(yīng)使用450nm波長進(jìn)行讀數(shù)，其他波長可能導(dǎo)致誤差。

7. 本試劑盒僅用于科研實(shí)驗和診斷參考，不適用于臨床診斷和治療。

結(jié)果分析

根據(jù)試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品濃度及對應(yīng)的OD值，利用標(biāo)準(zhǔn)品繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，通過計算得到待測樣品的濃度。

化學(xué)實(shí)驗室守則

1. 實(shí)驗室要保持安靜，嚴(yán)禁大聲喧嘩、吵鬧。

2. 在實(shí)驗前，要預(yù)先作好實(shí)驗前前準(zhǔn)備，進(jìn)入實(shí)驗室時，要有秩序，按規(guī)定的座位就座。

3. 實(shí)驗前，必須了解清楚實(shí)驗內(nèi)容、目的、要求和實(shí)驗步驟。

4. 實(shí)驗開始時，應(yīng)先查點(diǎn)儀器、產(chǎn)品是否齊全，不得隨意調(diào)換，如發(fā)現(xiàn)問題，及時報告。

5. 實(shí)驗必須按步驟進(jìn)行，并仔細(xì)觀察，做好記錄，實(shí)驗后后及時寫好實(shí)驗報告。

6. 實(shí)驗時，要愛護(hù)儀器，節(jié)省產(chǎn)品，由于違反操作規(guī)程而損壞丟失的儀器，必須賠償。

7. 實(shí)驗結(jié)束，要將儀器整理或清洗，保持桌面，室內(nèi)的整潔后才能離開。

8. 本守則在實(shí)驗前都應(yīng)需知。

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