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簡要描述:人果糖二磷酸醛縮酶A(ALDOA)ELISA試劑盒 :質(zhì)量穩(wěn)定,準(zhǔn)確性高。篤瑪生物全程提供技術(shù)指導(dǎo),確保您實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性還提供免費(fèi)代測服務(wù)。您只需提供代測樣本,七個(gè)工作日內(nèi)即可為您提供代測數(shù)據(jù)。歡迎前來咨詢,訂購。
人果糖二磷酸醛縮酶A(ALDOA)ELISA試劑盒
試劑盒性能
1. 特異性高:由于是抗原抗體的特異性結(jié)合,因此試驗(yàn)的特異性很高,能夠排除其他物質(zhì)的干擾。
2. 靈敏度高:由于酶的放大作用,使得試驗(yàn)的靈敏度大大提高,能夠檢測出微量的抗原或抗體。
3. 操作簡便:ELISA試驗(yàn)操作相對簡單,容易掌握,適合于大規(guī)模樣本檢測。
4. 適用范圍廣:可以用于檢測各種抗原、抗體和激素等生物分子。
用途:
主要用于定量測定血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其他相關(guān)生物液體中的含量。
產(chǎn)品保存:
2-8℃、有效期6個(gè)月,我司單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP1)酶聯(lián)試劑盒均為批次,您可放心選購。
規(guī)格:48T/96T
有效期:6個(gè)月
優(yōu)勢:靈敏性高,性,吸附均勻,吸附性好,回收利用率高
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被相關(guān)指標(biāo)的抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的相關(guān)指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
操作步驟
1)涂層:微孔板的孔涂上捕獲抗體或抗原。
2)封閉:孔內(nèi)加入封閉劑(如牛血清白蛋白或羧甲基纖維素),阻止非特異性蛋
白質(zhì)結(jié)合。
3)樣本添加:加入含有未知濃度的目標(biāo)抗原或抗體的樣本。
4)洗滌:去除未結(jié)合的物質(zhì)。
5)檢測抗體添加:加入對特定抗原有特異性的酶標(biāo)記檢測抗體。
6) 再次洗滌:再次去除未結(jié)合的檢測抗體。
7)底物添加:加入酶的底物,酶作用于底物產(chǎn)生顏色變化。
8)終止反應(yīng):加入終止溶液停止酶的反應(yīng)(在某些類型的ELISA中需要)。
9) 讀數(shù):使用光譜光度計(jì)測定每個(gè)孔的吸光度(通常是在特定波長下),吸光度
與樣本中抗原或抗體的濃度成正比。
人果糖二磷酸醛縮酶A(ALDOA)ELISA試劑盒
標(biāo)本的采集及保存
1.血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時(shí)或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 (注:標(biāo)本溶血會(huì)影響**檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。)
結(jié)果分析
根據(jù)試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品濃度及對應(yīng)的OD值,利用標(biāo)準(zhǔn)品繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,通過計(jì)算得到待測樣品的濃度。
性能:
1.準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2.靈敏度:檢測濃度小于10 pg/ml。
3.特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
試劑盒特點(diǎn)
1.專一性強(qiáng)。
抗原與抗體的反應(yīng)是專一反應(yīng),而酶技術(shù)以反應(yīng)為基礎(chǔ),所檢測的對象是抗原(或抗體),使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,與普通抗體的反應(yīng)特性并無多大差別。
2.靈敏度高。
由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應(yīng),顯示抗原與抗體的結(jié)合,大大提高了檢測的靈敏性,使檢測水平接近放射測定法。
3.樣品易保存。
經(jīng)過酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。
4.結(jié)果易觀察。
對檢測結(jié)果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(jì)進(jìn)行比色測定,還可用顯微鏡觀察。這是因?yàn)槟承┟阜磻?yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變,從而引起被檢測物的顯示。
5.可以定量測定。
溶液中的抗原物質(zhì),應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量。預(yù)計(jì)用細(xì)胞分光光度計(jì)可對組織內(nèi)的抗原進(jìn)行酶技術(shù)的定量測定。
6.可以大規(guī)模測定樣品。
如有成千上萬份樣品需要進(jìn)行檢測,酶技術(shù)都能在較短時(shí)間內(nèi)完成。
7.儀器和試劑簡單。
對沒技術(shù)來說,不需要熒光顯微鏡,也不需要測定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,普通實(shí)驗(yàn)室及生產(chǎn)應(yīng)用單位均易購置.
*特別提醒*
1.取樣和存樣所用的凍存管、離心管、吸頭等需高溫滅菌處理;
2.所有存樣管口需以封口膜封好;
3.所有樣品管壁需要用防水記號(hào)筆清晰標(biāo)明編號(hào)(便于區(qū)分即可);
免責(zé)聲明
試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或生物體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān), 本公司概不負(fù)責(zé)。
嚴(yán)格按照說明書操作,不同批號(hào)不可交換使用,實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)
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