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人激酶錨定蛋白12(AKAP12) ELISA 試劑盒
ELISA試劑盒的原理
ELISA是一種基于抗原-抗體反應(yīng)的檢測方法。在ELISA試劑盒中,已知的AKAP12抗體被固定在固相載體上,當(dāng)加入待測樣本后,樣本中的AKAP12與固相抗體結(jié)合。然后加入酶標(biāo)記的AKAP12抗體,與固相抗體上的AKAP12形成抗原-抗體復(fù)合物。最后加入底物顯色,根據(jù)顏色的深淺,即可判斷待測樣本中AKAP12的濃度。
ELISA試劑盒的使用步驟
1. 準(zhǔn)備樣本:采集待測樣本,根據(jù)試劑盒說明書的要求進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶幚怼?br style="box-sizing: initial; max-width: 100%;"/>2. 加樣:將處理后的樣本加入到ELISA板孔中,根據(jù)試劑盒說明書的要求控制加樣量。
3. 孵育:將ELISA板放入37℃孵育一定時間,使AKAP12與抗體結(jié)合。
4. 洗滌:按照試劑盒說明書的要求,將未結(jié)合的物質(zhì)洗滌掉。
5. 酶標(biāo)抗體加入:按照試劑盒說明書的要求,加入酶標(biāo)記的抗體。
6. 孵育:再次將ELISA板放入37℃孵育一定時間。
7. 洗滌:再次按照試劑盒說明書的要求,將未結(jié)合的物質(zhì)洗滌掉。
8. 顯色:加入底物顯色。
9. 終止反應(yīng):加入終止液,停止顯色反應(yīng)。
10. 讀數(shù):用酶標(biāo)儀在450nm波長處讀取各孔的光密度值(OD值),根據(jù)OD值計算AKAP12的濃度。
人激酶錨定蛋白12(AKAP12) ELISA 試劑盒
注意事項
1. 使用前應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書,確保了解所有操作步驟和注意事項。
2. 確保試劑盒在有效期內(nèi)且未開封使用過。如發(fā)現(xiàn)試劑盒損壞或過期,應(yīng)立即停止使用。
3. 操作過程中應(yīng)保持清潔衛(wèi)生,避免交叉污染。
4. 嚴(yán)格按照試劑盒說明書的要求進(jìn)行加樣和孵育等操作,確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。
5. 在顯色反應(yīng)期間,應(yīng)避免光線直接照射到ELISA板,以免影響實驗結(jié)果。
6. 在讀數(shù)時,應(yīng)選擇合適的波長進(jìn)行測量,確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。
7. 如發(fā)現(xiàn)實驗結(jié)果異?;虿环项A(yù)期,應(yīng)重新進(jìn)行實驗或咨詢專業(yè)人士的意見。
結(jié)果判斷
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
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