人膜聯(lián)蛋白A3(ANXA3) ELISA 試劑盒  

原理

1. 抗體或抗原的吸附：將待測抗原或抗體吸附到固相載體上，常用的載體有微孔板、玻璃纖維、聚苯乙烯等。這些載體表面具有特殊的化學(xué)基團(tuán)，能夠與待測抗原或抗體特異性結(jié)合。

2. 酶標(biāo)記的抗體或抗原的結(jié)合：將酶標(biāo)記的抗體或抗原與待測抗原或抗體結(jié)合，形成酶標(biāo)記的抗原-抗體復(fù)合物。酶標(biāo)記的抗體或抗原具有高度的特異性和親和力，能夠與待測抗原或抗體形成穩(wěn)定的復(fù)合物。

3. 底物顯色反應(yīng)：當(dāng)酶標(biāo)記的抗原-抗體復(fù)合物與底物溶液接觸時(shí)，酶能夠催化底物分解，產(chǎn)生顏色變化。通過測量顏色的變化程度，可以判斷待測抗原或抗體的濃度。

ELISA試劑盒的使用步驟

1. 準(zhǔn)備樣本：采集待測樣本，根據(jù)試劑盒說明書的要求進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶幚怼?br style="box-sizing: initial; max-width: 100%;"/>2. 加樣：將處理后的樣本加入到ELISA板孔中，根據(jù)試劑盒說明書的要求控制加樣量。
3. 孵育：將ELISA板放入37℃孵育一定時(shí)間，使樣本與抗體結(jié)合。
4. 洗滌：按照試劑盒說明書的要求，將未結(jié)合的物質(zhì)洗滌掉。
5. 酶標(biāo)抗體加入：按照試劑盒說明書的要求，加入酶標(biāo)記的抗體。
6. 孵育：再次將ELISA板放入37℃孵育一定時(shí)間。
7. 洗滌：再次按照試劑盒說明書的要求，將未結(jié)合的物質(zhì)洗滌掉。
8. 顯色：加入底物顯色。
9. 終止反應(yīng)：加入終止液，停止顯色反應(yīng)。
10. 讀數(shù)：用酶標(biāo)儀在450nm波長處讀取各孔的光密度值(OD值)，根據(jù)OD值計(jì)算濃度。

人膜聯(lián)蛋白A3(ANXA3) ELISA 試劑盒  

注意事項(xiàng)

1. 使用前應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書，確保了解所有操作步驟和注意事項(xiàng)。
2. 確保試劑盒在有效期內(nèi)且未開封使用過。如發(fā)現(xiàn)試劑盒損壞或過期，應(yīng)立即停止使用。
3. 操作過程中應(yīng)保持清潔衛(wèi)生，避免交叉污染。
4. 嚴(yán)格按照試劑盒說明書的要求進(jìn)行加樣和孵育等操作，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
5. 在顯色反應(yīng)期間，應(yīng)避免光線直接照射到ELISA板，以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6. 在讀數(shù)時(shí)，應(yīng)選擇合適的波長進(jìn)行測量，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
7. 如發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果異常或不符合預(yù)期，應(yīng)重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn)或咨詢專業(yè)人士的意見。

結(jié)果判斷

 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：在Excel工作表中，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。